Udførelse af perfusionsafgrødeeksperimenter

For at opretholde den nødvendige temperatur på 37 ° C i en perfusionsafgrødebeholder bruges en opvarmningsplade (MEDAX-Nagel, Kiel, Tyskland) og et dæklåg (ikke vist) under udførelse af afgrødeforsøg over uger (figur 5, 7). Transporten af ​​afgrødemedium udføres bedst ved hjælp af en langsomt roterende peristaltisk pumpe (ISMATEC, IPC N8, Wertheim, Tyskland). Det er i stand til at levere justerbare og nøjagtige pumpehastigheder mellem 0,1 og 5 ml i timen.

På passagen fra opbevaringsflasken gennem perfusionsafgrødsbeholdermediet transporteres langs en monteret vævsbærer for at tilvejebringe indeholdte celler. Den nøjagtige geometriske placering af vævsbæreren i en perfusionsafgrødebeholder garanterer under transport af medium tilførsel med altid frisk ernæring og åndedrætsgas fra alle sider. På samme tid forhindrer det en ufysiologisk ophobning af metaboliske produkter og en overskridelse af paracrine faktorer. For at opretholde dette kontrollerede miljø for hele afgrøden opsamles det metaboliserede medium i en separat affaldsflaske. I virkeligheden recirkuleres medium ikke.

Billede 216A | Figur 7: Opsætning af perfusionsafgrøder med et epitel inden i en gradient perfusion afgrødebeholder. En termoplade opretholder den ønskede temperatur på 37 ° C. For at forsyne luminal- og basalsiden af ​​det indeholdte epitel med ernæring og åndedrætsgas transporterer to kanaler af en peristaltisk pumpe et rødt og et klart medium med nøjagtigt den samme hastighed på 1,25 ml / h fra en opbevaringsflaske (venstre side) til affaldsflaske (højre side). Til eliminering af gasbobler under transport af medium anbringes et gasudvidelsesmodul foran gradientbeholderen. | Tonmaurer / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0/legalcode) | Page URL : (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Minusheet_Figure_7.jpg) from Wikimedia Commons

Billede 216A | Figur 7: Opsætning af perfusionsafgrøder med et epitel inden i en gradient perfusion afgrødebeholder. En termoplade opretholder den ønskede temperatur på 37 ° C. For at forsyne luminal- og basalsiden af ​​det indeholdte epitel med ernæring og åndedrætsgas transporterer to kanaler af en peristaltisk pumpe et rødt og et klart medium med nøjagtigt den samme hastighed på 1,25 ml / h fra en opbevaringsflaske (venstre side) til affaldsflaske (højre side). Til eliminering af gasbobler under transport af medium anbringes et gasudvidelsesmodul foran gradientbeholderen. | Tonmaurer / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0/legalcode) | Page URL : (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Minusheet_Figure_7.jpg) from Wikimedia Commons

Forfatter : Milos Pawlowski

Referencer:

Almindelige molekylærbiologiteknikker II

Værktøjer til molekylærbiologi V

Kommentarer